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[发明专利]一种提高刺糖多孢菌多杀菌素产量的方法-CN202280005732.2在审
发明人：刘天罡;刘然;邓子新 -专利权人：武汉大学
申请日： 2022-04-08 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12P19/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高刺糖多孢菌多杀菌素产量的方法，属于基因工程领域。本发明方法为在刺糖多孢菌中过表达spnF基因和/或spnP基因，通过在刺糖多孢菌中过表达spnF基因和/或spnP基因可获得高产多杀菌素的刺糖多孢菌基因工程菌。本发明发现过表达spnF基因和/或spnP基因可使刺糖多孢菌的多杀菌素产量得到显著提升。
一种提高刺糖多孢菌多杀菌产量方法

[发明专利]一种整合酶及其在改造刺糖多孢菌中的应用-CN201410203581.9有效
发明人：覃重军;夏海洋;党福军;陈建 -专利权人：中国科学院上海生命科学研究院
申请日： 2014-05-14 - 公布日： 2019-01-25 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种新的整合酶及其在刺糖多孢菌遗传改造中的应用。具体地，所述的整合酶来自糖多孢菌CCTCC AA208003(Saccharopolyspora endophytica)，且所述的整合酶通过特定的顺式原件,可在刺糖多孢菌染色体特异性定点整合外源DNA此外，本发明人还通过刺糖多孢菌不同菌株遗传因子的研究发现了不同菌株来源的可在刺糖多孢菌内的自主游离复制区。基于本发明的整合酶以及复制区域序列构建载体可用于刺糖多孢菌的遗传改造，可能发现新型的多杀菌素类似物，也可能提高多杀菌素发酵产量。可通过质粒携带不同的抗性分子标记，用于刺糖多孢菌种间或者属间的基因组shuffling操作，实现高效基因组重排。
一种整合及其高效改造刺糖多孢菌中的应用

[发明专利]一株刺糖多孢菌多杀菌素高产工程菌株及其应用-CN201510444997.4有效
发明人：夏立秋;杨燕;丁学知;胡胜标 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2015-07-27 - 公布日： 2018-02-13 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：一株刺糖多孢菌多杀菌素高产工程菌株及其应用，所述刺糖多孢菌多杀菌素高产工程菌株，即刺糖多孢菌S.sp‑△pepA，Saccharopolyspora spinosa S.sp‑△pepA,于2015年6本发明之刺糖多孢菌S.sp‑△pepA中多杀菌素产量提高到原始菌株的137%。
一株刺糖多孢菌多杀菌高产工程菌株及其应用

[发明专利]一种刺糖多孢菌DS190375及其发酵产物、菌剂、发酵与筛选方法及应用-CN202010623451.6有效
发明人：赵子刚;刘露;金明义;张葵 -专利权人：北大方正集团有限公司;北大医药重庆大新药业股份有限公司;北大医疗产业集团有限公司
申请日： 2020-06-30 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，具体公开了一种刺糖多孢菌DS190375及其发酵产物、菌剂、发酵与筛选方法及应用。本发明的刺糖多孢菌DS190375，其保藏编号为CGMCC No.18681。其发酵方法为先将该菌在高盐平板培养基中进行复壮筛选，然后再进行发酵。本发明还提供多杀菌素产量高的一类刺糖多孢菌的筛选方法，先筛选获得耐盐性高的刺糖多孢菌，再对获得的耐盐性高的刺糖多孢菌进行筛选，获得多杀菌素产量高的菌株。本发明的刺糖多孢菌DS190375耐高盐、多杀菌素产量高。发酵方法避免了因菌株性能退化所产生的多杀菌素产量不稳定的问题。
一种刺糖多孢菌 ds190375 及其发酵产物菌剂筛选方法应用

[发明专利]高产多杀菌素的刺糖多孢菌及提高菌株多杀菌素产量的方法-CN202011009196.2在审
发明人：刘天罡;刘然 -专利权人：武汉大学
申请日： 2020-09-23 - 公布日： 2020-12-22 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一类高产多杀菌素的刺糖多孢菌及提高菌株多杀菌素产量的方法，所述高产多杀菌素的刺糖多孢菌包括J1‑019‑A菌株、过表达spnJ或过表达spnP的多杀菌素生产菌株刺糖多孢菌；所述J1‑019‑A菌株为在原多杀菌素生产菌株刺糖多孢菌的基因组上敲除了与多杀合成不相关的聚酮合酶基因簇，并引入了可以后续进行方便改造的attB位点，所述过表达spnJ或过表达spnP的多杀菌素生产菌株刺糖多孢菌为在原多杀菌素生产菌株刺糖多孢菌中过表达本发明提供的多杀菌素生产菌株经过发酵罐的放大发酵，可实现多杀菌素的发酵生产，可以达到工业化生产的潜力。
高产杀菌刺糖多孢菌提高菌株产量方法

[发明专利]一种高产多杀菌素J/L的工程菌及其构建方法与应用-CN202111481451.8在审
发明人：黄科学;何天景;翟晓云;刘家亨 -专利权人：齐鲁制药（内蒙古）有限公司
申请日： 2021-12-06 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明涉及一种高产多杀菌素J/L的工程菌及其构建方法与应用。本发明中是以刺糖多孢菌QL‑1为出发菌株，通过插入crRNA抑制刺糖多孢菌QL‑1的spnK基因表达至失活，构建得到高产多杀菌素J/L的QL‑1/pQL‑spnK‑crRNA基因工程菌。本发明首次在刺糖多孢菌中引入CRISPRi技术，通过CRISPR/ddcpf1方法对spnK基因进行了抑制失活，从而实现了多杀菌素J/L的高水平表达，进而达到了高产多杀菌素J/L的目的。本发明构建的QL‑1/pQL‑spnK‑crRNA工程菌可以稳定传代，并且能够显著提高刺糖多孢菌多杀菌素J/L的产量，是野生刺糖多孢菌的8～9倍。
一种高产杀菌工程及其构建方法应用

[发明专利]一株bldD基因加倍的刺糖多孢菌重组菌株-CN201510442730.1在审
发明人：夏立秋;蔡妹;丁学知;孙运军 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2015-07-24 - 公布日： 2015-10-21 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：一株bldD基因加倍的刺糖多孢菌重组菌株，所述bldD基因加倍的刺糖多孢菌重组菌株，由光秃型基因bldD整合到刺糖多孢菌染色体组产生。本发明之bldD基因加倍的刺糖多孢菌重组菌株，即刺糖多孢菌S. spinosa-BldD，于2015年5月31日在中国典型培养物保藏中心保藏，菌种保藏号为CCTCC NO：M摇瓶发酵结果显示，重组菌株多杀菌素产量与对照菌株相比提高到1.35倍。
bldd 基因加倍刺糖多孢菌重组菌株

[发明专利]利用刺糖多孢菌菌株J1-DS1902制备多杀菌素类化合物的方法-CN202110671480.4在审
发明人：刘然 -专利权人：武汉臻智生物科技有限公司
申请日： 2021-06-17 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及生物发酵技术领域，具体而言，本发明涉及利用刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)J1‑DS1902制备多杀菌素类化合物的方法。发明人通过从大量的菌株中筛选出一株高产多杀菌素菌株刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)J1‑DS1902，利用其发酵制备多杀菌素摇瓶产量高达2.9g/L，相比野生型的刺糖多孢菌，大大提高了多杀菌素产量。因此，刺糖多孢菌J1‑DS1902可作为多杀菌素高产的工业化菌株进行开发。
利用刺糖多孢菌菌株 j1 ds1902 制备杀菌化合物方法

[发明专利]基于代谢组学改进刺糖多孢菌发酵条件以提高多杀菌素产量的方法-CN201410736930.3在审
发明人：卢文玉;尹静;张传波 -专利权人：天津大学
申请日： 2014-12-04 - 公布日： 2015-03-25 - 主分类号： C12P19/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于代谢组学改进刺糖多孢菌发酵条件以提高多杀菌素产量的方法，包括以下步骤：(1)对刺糖多孢菌胞内的代谢物进行测定；(2)对刺糖多孢菌产多杀菌素能力进行分析；(3)PLS分析；(4)过程分析；本发明利用代谢组学手段并结合多元统计揭示刺糖多孢菌发酵产多杀菌素过程中的代谢物变化规律，进一步阐释与多杀菌素生产相关的代谢变化机制。通过对刺糖多孢菌在不同生长环境下的产多杀菌素能力和代谢水平进行分析，找到与产多杀菌素相关的代谢物，从而为其培养工艺的优化，多杀菌素发酵产量的提高提供方向。
基于代谢改进刺糖多孢菌发酵条件提高杀菌产量方法

[发明专利]刺糖多孢菌基因组尺度代谢网络模型及构建方法及应用-CN201310756418.0有效
发明人：卢文玉;王晓阳;张传波;薛超友 -专利权人：天津大学
申请日： 2013-12-31 - 公布日： 2017-01-25 - 主分类号： G06F19/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种刺糖多孢菌基因组尺度代谢网络模型及构建方法及应用，构建方法包括如下步骤根据KEGG及NCBI数据库中刺糖多孢菌基因组序列的注释信息，添加多杀菌素生物合成的特征反应和菌体合成反应，并对网络反应进行手动精炼，获得刺糖多孢菌基因组尺度代谢网络模型。本发明利用刺糖多孢菌基因组尺度代谢网络模型，预测潜在基因靶点对多杀菌素产量提高的影响，最终确定改造方向，实现菌株的途径分子改造方法。实验证明，利用本发明的刺糖多孢菌基因组尺度代谢网络模型预测的基因，经改造得到的基因工程菌能使多杀菌素产量比野生型菌株提高了86.5%。为以后多杀菌素高效生产合成菌株的构建、研究和分析提供了指导平台。
刺糖多孢菌基因组尺度代谢网络模型构建方法应用

[发明专利]基于刺糖多孢菌内源CRISPR-Cas系统编辑载体的构建及其应用-CN202310015439.0在审
发明人：芦银华;王文方;陈少欣;郑国松;王思瑶;何慧研 -专利权人：上海师范大学
申请日： 2023-01-05 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明提供一种基于刺糖多孢菌内源CRISPR‑Cas系统编辑载体的构建及其应用。本发明第一方面提供一种基于刺糖多孢菌内源CRISPR‑Cas系统构建的核酸分子，包括Repeat序列和crRNA序列，所述Repeat序列位于所述crRNA序列的上游和下游，其中：Repeat序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；crRNA序列靶向刺糖多孢菌基因组中PAM序列的下游序列，可由反向互补的两条引物退火合成，所述PAM序列包括TCA、TCG、CCA、CCG中的一种。本发明可敲除刺糖多孢菌基因组的目标基因，为刺糖多孢菌的功能基因组研究、代谢工程及合成生物学改造育种提供了有力的遗传操作工具。
基于刺糖多孢菌内源 crispr cas 系统编辑载体构建及其应用

[发明专利]刺糖多孢菌多杀菌素高产工程菌及其构建方法和应用-CN202310510743.2在审
发明人：薛超友;蔡朝辉 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2023-05-08 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明公开了刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)多杀菌素高产菌株及其构建方法，所述刺糖多孢菌多杀菌素高产菌株构建方法步骤：基于大肠杆菌—刺糖多孢菌的穿梭质粒，构建含有kasOp*强启动子和强RBS序列启动的，SpnG和SpnS基因表达盒的重组质粒；将重组质粒通过结合转移导入刺糖多孢菌，得到多杀菌素高产的菌株。本发明的方法具有较高的遗传转化效率，构建的基因重组工程菌多杀菌素的产量显著提高。
刺糖多孢菌多杀菌高产工程及其构建方法应用

[发明专利]一株刺糖多孢菌鼠李糖生物合成基因加倍工程菌株-CN201510444998.9在审
发明人：夏立秋;杨燕;丁学知;孙运军 -专利权人：湖南师范大学
申请日： 2015-07-27 - 公布日： 2015-10-07 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：一株刺糖多孢菌鼠李糖生物合成基因加倍工程菌株，所述刺糖多孢菌鼠李糖生物合成基因加倍工程菌株，即刺糖多孢菌S. sp-RM，Saccharopolyspora spinosa S. sp-RM，于2015PCR鉴定结果表明，该质粒已成功地整合至须糖多孢菌基因组上；实时荧光定量PCR结果显示，工程菌中 gdh、kre、epi和gtt基因的转录水平分别比原始菌株提高了80.3倍、30.8倍、23.8倍和18.3倍；HPLC检测结果表明，工程菌S. sp-RM中多杀菌素产量比原始菌株提高73 %。
一株刺糖多孢菌鼠李糖生物合成基因加倍工程菌株

[发明专利]一株高产多杀菌素的刺糖多孢菌-CN202110670419.8有效
发明人：刘天罡;刘然;邓子新 -专利权人：武汉大学
申请日： 2021-06-17 - 公布日： 2022-10-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产多杀菌素的刺糖多孢菌，属于微生物技术领域。本发明高产多杀菌素的刺糖多孢菌为保藏编号为CCTCC NO：M 2021307的刺糖多孢菌(Saccharopolysporaspinosa)WHU1107，该菌株经过诱变后得到，其在装有25mL发酵培养基的培养瓶中经发酵培养后多杀菌素的产量高达4g/L以上，远高于现有已报道菌株，可用于生产多杀菌素。本发明为多杀菌素的产业化生产提供了新的材料。
高产杀菌刺糖多孢菌

[发明专利]用于糖多孢菌的转座质粒及其应用-CN201910379905.7有效
发明人：陶美凤;白露露;王业民;邓子新 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2019-05-08 - 公布日： 2022-11-15 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了用于糖多孢菌的转座质粒及其应用；该转座质粒为Tn5转座质粒—pJTn1～pJTn6，这些转座质粒均可在红色糖多孢菌中进行高效转座，其中pJTn1及pJTn5成功在刺糖多孢菌中进行体内转座，得到通过转座突变子发酵、检测发酵液中多杀菌素产量，发现转座的插入对多杀菌素的产量有明显的影响。该转座体系对多杀菌素在刺糖多孢菌中的生物合成调控具有重要意义。
用于糖多孢菌质粒及其应用

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